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经常有小伙伴说,哇,细胞怎么那么难养啊,比女朋友都娇贵啊?养细胞的你,在实验中,有没有这样的烦恼呢?其实,在细胞培养过程中,最基本的培养基真的很重要,一定要先选对合适的培养基,再好好开展实验。
细胞都没有绝对最好的培养条件,只有更加适合,就像我们生活中找男女朋友一样,没有最好,只有最合适。比如在MEM中培养的细胞,很可能在DMEM或M199中也很容易生长。总之,MEM是贴壁细胞最好的选择,而 RPMI-1640是悬浮细胞培养一个好的选择,当然,这是在对细胞培养条件不明确的时候,是好的选择;当培养条件有明确标注的时候,就需要按照指明的来进行,因为好的细胞会让实验事半功倍。
下面介绍几种在培养细胞起到很大影响的试剂:
酚红:酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。研究表明,酚红可以模拟固醇类激素的作用,(特别是雌激素)。为避免固醇类反应,培养细胞,尤其是哺乳类细胞时,用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测,一些研究人员在做流式细胞检测时,也不使用加有酚红的培养基。
L-谷氨酰胺和GlutaMAX-I:L-谷氨酰胺在脱掉氨基后可作为培养细胞的能量来源、多参与蛋白质的合成和核酸代谢。L-谷氨酰胺在溶液中经过一段时间后会降解,而 L-谷氨酰胺的降解会导致氨的形成,氨对细胞有毒性,因此敏感细胞不建议使用。 一般培养细胞建议使用GlutaMAX-I,因为GlutaMAX-I 二肽溶液有较小的降解,如果在相同条件下,L-谷氨酰胺几乎完全降解。
亲爱的小伙伴,你get到了吗?下次培养细胞,先了解一下细胞的性质,把基础的培养基先选对哦!
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